色譜柱是色譜系統的“心臟”。液相色譜柱,是一種用于液體色譜分析儀器,分離作用是在填料與流動相之間進行的,柱子的分類是根據填料類型決定的。
正相柱:多以硅膠為柱填料。根據外型可分為無定型和球型兩種,其顆粒直徑在3-10μm的范圍內。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。
反相柱:主要是以硅膠為基質,在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分。
在日常使用中不注意就會出現各種突發狀況,比如降低柱效縮短使用壽命甚至損壞,嚴重時甚至影響項目的進度。因此液相色譜柱的正確使用和維護十分重要。
1、認證閱讀使用說明書;
2、使用填充良好的色譜柱;
3、盡量減少壓力波動,避免機械及熱沖擊;
4、使用保護柱及在線過濾器;
5、經常以強溶劑沖洗色譜柱;
6、充分過濾樣品及流動相,盡量避免雜質微粒與強保留成分;
7、用穩定的固定相;
8、在中等PH值操作(6~8),用有機緩沖溶液;
9、色譜柱使用溫度小于40℃;
10、硅膠基質的的色譜柱,應保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0;
11、在水流動相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉;
12、流動相中含有緩沖溶液,應注意應95∶5的水及有機溶劑過渡,有機溶劑不能低于5%;
13、過夜或貯存時,沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機溶劑流動相保存。