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快速分析中色譜柱的選擇 系列攻略彈:關(guān)于粒徑
更新時間:2019-08-08   點擊次數(shù):4464次


近年來,在液相色譜分析領(lǐng)域,“快速分析”的話題越來越多被提起。而在2020年版《中國藥典編制大綱》中,也提到“積極倡導(dǎo)綠色標(biāo)準(zhǔn)和經(jīng)濟(jì)標(biāo)準(zhǔn),推廣采用毒性小、污染少、節(jié)約資源、保護(hù)環(huán)境、簡便實用的檢測方法”。

 

“快速分析”能帶來的好處有很多方面,例如,方法開發(fā)階段,提高分析速度可以節(jié)約分析時間;還可以節(jié)約有機溶劑、降低成本、保護(hù)環(huán)境,等等。

 

那么,當(dāng)我們談?wù)摽焖俜治鰰r,我們在談?wù)撌裁矗?/strong>

 

快速分析的目的

 

● 增加每天所能分析的樣品數(shù)量(早點下班!)

● 謀求更高分離度(早點下班!)

● 節(jié)約溶劑,降低成本、保護(hù)環(huán)境(省錢!)

● 減少分析時間過長的項目耗時(早點下班!)

 

想要達(dá)成以上目的,可以通過提高流速、縮短色譜柱長度和內(nèi)徑等方法進(jìn)行分析調(diào)整。但是,如果直接縮短柱長或提高流速,可能會對分離造成不良影響,或使目標(biāo)化合物無法溶出、洗脫。反過來說,選擇分離能力強的色譜柱非常關(guān)鍵。

 

 

那么,分離能力受哪些因素影響呢?說起背后的原理和實際操作之間的聯(lián)系,一篇文章可說不完~

 

因此,鴻朗又開了新的液相豆丁帖——快速分析中色譜柱的選擇系列攻略,希望能在結(jié)合實際操作的同時,和大家一起探討色譜分析背后的奇妙原理~

 

那么,今天將對快速分析時的關(guān)鍵因素——粒徑進(jìn)行介紹~

01

粒徑

理論塔板數(shù) N(柱效)= L / H

柱效下降,分離變差

為保證分離,應(yīng)選用小粒徑

(3 μm、2 μm)

 

 

Van Deemter方程

范德姆特方程我們都很熟悉了:

 

H =  A + B/u + Cu

 

A  : 渦流擴(kuò)散項

      ?由粒徑大小決定

B/u  : 縱向擴(kuò)散項

      ?流速越小數(shù)值越大

Cu:傳質(zhì)阻力項

      ?與粒徑大小和流速有關(guān)

 

 

相比5 μm柱,3 μm和2 μm柱:

 

?在同等流速下,理論塔板高度更小

(同等柱長,柱效更高)

?即使在更高流速下,也能保持較低理論塔板高度

(高流速下,也能得到高柱效)

 

粒徑與柱長

樣品:

①地昔帕明  ②丙咪嗪  ③地昔帕明  ④阿米替林  ⑤*丙咪嗪

 

如上圖,分別使用不同粒徑、不同柱長的IF(S2)和兩款MGIII(S3和S5)色譜柱,對5種抗抑郁藥進(jìn)行了分析。

 

可以看出,當(dāng)粒徑由5 μm變?yōu)? μm、3 μm變?yōu)? μm時,分別對應(yīng)150 mm、100 mm和50 mm長度的色譜柱,終,在同等理論塔板數(shù)的前提下,分析時間大幅縮短。

 

也就是說:小粒徑色譜柱能得到更尖銳的峰形和更高的理論塔板數(shù);縮短色譜柱長度,可相應(yīng)縮短分析時間。

 

那么,柱長和粒徑之間的換算關(guān)系如何呢?

 

分離效率:L / Dp

 

L / Dp =  50000為前提,

250 mm L,5 μm

150 mm L, 3 μm

or

100 mm L, 2 μm

因此,為保證分離

在縮短柱長的同時,應(yīng)選用小粒徑柱

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